Abstraktne:Perekonda Salvia L. (Lamiaceae) kasutatakse laialdaselt farmaatsia- ja toiduainetööstuses. Traditsioonilises meditsiinis kasutatakse laialdaselt mitmeid bioloogiliselt olulisi liike, sealhulgas Salvia aurea L. (sün. S. africana-lutea L.), mida kasutatakse traditsioonilise naha desinfitseerimisvahendina ja haavade paranemise vahendina; sellegipoolest pole neid omadusi veel kinnitatud. Käesoleva uuringu eesmärk on iseloomustada S. aureuse eeterlikku õli (EO), paljastades selle keemilise koostise ja kinnitades selle bioloogilisi omadusi. EO saadi hüdrodestilleerimisega ja seejärel analüüsiti GC-FID ja GC-MS abil. Hinnati erinevaid bioloogilisi aktiivsusi: seenevastast toimet dermatofüütidele ja pärmseentele ning põletikuvastast potentsiaali, hinnates lämmastikoksiidi (NO) tootmist ning COX-2 ja iNOS valgu taset. Haavade paranemise omadusi hinnati kriimustuste paranemise testi abil ja vananemisvastast võimekust hinnati vananemisega seotud beeta-galaktosidaasi aktiivsuse kaudu. S. aurea EO-d iseloomustavad peamiselt 1,8-tsineool (16,7 protsenti), -pineen (11,9 protsenti), cis-tujoon (10,5 protsenti), kamper (9,5 protsenti) ja (E)-karüofüleen (9,3 protsenti). protsenti). Tulemused näitasid dermatofüütide kasvu tõhusat pärssimist. Lisaks vähendas see oluliselt iNOS/COX-2 valgu taset ja samaaegselt NO vabanemist. Lisaks oli EO-l vananemisvastane potentsiaal ja paranenud haavade paranemine. Üldiselt toob see uuring esile Salvia aurea EO märkimisväärsed farmakoloogilised omadused, mida tuleks uuenduslike, jätkusuutlike ja keskkonnasõbralike nahatoodete väljatöötamiseks veelgi uurida.

Tistanche glükosiid võib samuti suurendada SOD aktiivsust südame- ja maksakudedes ning oluliselt vähendada lipofustsiini ja MDA sisaldust igas koes, eemaldades tõhusalt erinevaid reaktiivseid hapnikuradikaale (OH-, H2O₂ jne) ja kaitstes tekitatud DNA kahjustuste eest. OH-radikaalide poolt. Tsistanche fenüületanoidglükosiididel on tugev vabade radikaalide eemaldamisvõime, suurem redutseerimisvõime kui C-vitamiinil, nad parandavad SOD aktiivsust sperma suspensioonis, vähendavad MDA sisaldust ja omavad teatud kaitset sperma membraani funktsioonile. Tsistanche polüsahhariidid võivad suurendada SOD ja GSH-Px aktiivsust D-galaktoosi poolt põhjustatud eksperimentaalselt vananevate hiirte erütrotsüütides ja kopsukudedes, samuti vähendada MDA ja kollageeni sisaldust kopsudes ja plasmas ning suurendada elastiini sisaldust. hea puhastav toime DPPH-le, pikendab hüpoksia aega vananevatel hiirtel, parandab SOD aktiivsust seerumis ja aeglustab eksperimentaalselt vananevatel hiirtel kopsude füsioloogilist degeneratsiooni Raku morfoloogilise degeneratsiooniga on katsed näidanud, et Cistanche'il on hea antioksüdantne võime ja sellel on potentsiaal olla ravim naha vananemishaiguste ennetamiseks ja raviks. Samal ajal on Cistanche ehhinakosiidil märkimisväärne võime eemaldada DPPH vabu radikaale ja see suudab eemaldada reaktiivseid hapniku liike ja takistada vabade radikaalide poolt indutseeritud kollageeni lagunemist, samuti on sellel hea parandav toime tümiini vabade radikaalide anioonide kahjustustele.

Klõpsake valikul Kust Cistanche'i osta saab

【Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Sissejuhatus

Ravimtaimedel on mitmed organoleptilised omadused, mis aitavad kaasa nende kõrgele väärtusele farmaatsia-, toitumis-, kosmeetika- ja toiduainetööstuses. Nende sekundaarsed metaboliidid on kujunemas potentsiaalseteks kandidaatideks uute põletikuvastaste ja seenevastaste ravimite jaoks [1–3]. Muuhulgas on Lamiaceae perekonnast pärit aromaatsed liigid hästi tuntud oma eeterlike õlide rikkuse poolest, millel on suur hulk bioloogilisi toimeid, sealhulgas eelkõige põletiku- ja seenevastaseid [4–8]. Selle perekonna üks suuremaid ja tähtsamaid perekondi on perekond Salvia L., kuhu kuulub ligi 1000 liiki [9]. Mõnda neist kasvatatakse kogu maailmas nii kulinaarseks kui ka meditsiiniliseks otstarbeks; tegelikult on neid rahvameditsiinis juba ammu kasutatud [10,11]. Paljudel liikidel on olulised bioloogilised omadused, sealhulgas antibakteriaalne, seenevastane, antioksüdantne, põletikuvastane, vähivastane, hüpoglükeemiline ja dementsusevastane toime [12,13].

Kuigi seda perekonda on palju uuritud, on endiselt suur huvi nende liikide vastu, mida saab kultiveerida (kodustada) ja kasutada tervist edendavatel omadustel. On hästi teada, et sekundaarsed metaboliidid on taimede/keskkonna vastasmõjude tulemus. Seetõttu võivad kodustatud populatsiooni uuringud anda asjakohast teavet selle kohta, kas sekundaarsed metaboliidid ja nendega seotud bioloogilised omadused erinevad põlispopulatsioonist. Nende hulgas on Salvia aurea L. (sün. S. africana-lutea L.) oluline aromaatne liik, mida kasutatakse meditsiinilistel eesmärkidel Lääne-Kapimaal (Lõuna-Aafrikas) ja mida kasvatatakse paljudes maailma paikades aromaatsete liikidena. ravimtaim kui ka dekoratiiv (linnamööbel). See liik on umbes 2 meetri kõrgune hallikasroheline haruline aromaatne põõsas, mille lehed koguvad eeterlikku õli näärmetrihhoomidesse ja millel on iseloomulikud suured ja kuldpruunid õied [14]. Ta pärineb Lõuna-Aafrikast, kus selle geograafiline levik ulatub Kapi poolsaarelt lääne suunas Namaqualandi poole, aga ka neemest ida suunas Port Alfredi suunas Ida-Kapimaa provintsis. Tihti kutsutakse teda kas luitekeskkonnale omaseks "randsalveiks, sandsalieks" või oma õite iseloomuliku värvuse tõttu "pruuniks luitesalveiks" [15,16].

S. aurea on tuntud oma mitme kasutuse poolest traditsioonilises meditsiinis, eriti põletikuvastase ja meditsiinilise pesuvahendina haavade ja nahakahjustuste raviks. Lisaks kasutatakse seda liiki ka bronhiidi ja muude hingamisteede haiguste raviks, tugevdades selle antimikroobseid omadusi [17,18].

Dermatofüüte, eriti Trichophytoni, Epidermophytoni ja Microsporumi omasid, seostatakse sageli pindmiste mükoosidega [19]; invasiivsed infektsioonid võivad aga immuunpuudulikkusega inimesi mõjutada [20].

Nende infektsioonide ajal seonduvad seente epitoobid [21, 22] Toll-like retseptoritega (TLR), käivitades põletikueelse seisundi aktiveerimise. Üks olulisemaid selle seisundiga seotud teid on tuumafaktori kappa B (NF-κB) rada, mis hõlmab põletikuliste tsütokiinide sekretsiooni ja põletikueelsete ensüümide, näiteks indutseeritava lämmastikoksiidi süntaasi (iNOS) sünteesi. ja tsüklooksügenaas- 2 (COX-2) [23]. Need ensüümid vastutavad vastavalt lämmastikoksiidi (NO) ja prostanoidide tootmise eest [24,25].

Lisaks põhjustavad dermatofüüdid sageli nahakahjustusi [26]. Seetõttu on kahjustatud koe taastamiseks vaja haava paranemist; vastasel juhul muutub haav krooniliseks [27].

Seennakkused on endiselt rahuldamata kliiniline vajadus, kuna etioloogilised tegurid on sageli seotud resistentsusega ravi suhtes ja põhjustavad ägenemisi, samas kui tavapäraseid ravimeid seostatakse laialdaselt kõrvaltoimetega [28]. Lisaks on teada, et mitmed seenetüved on praeguste seenevastaste ainete suhtes resistentsed [29, 30]. Põletikuvastaseid ravimeid on seostatud ka mitmete kõrvaltoimetega [31]. Seetõttu on ülioluline välja töötada uued strateegiad, mis lisaks seennakkuste ravile võivad pärssida ka infektsiooni ajal esile kutsutud põletikueelset seisundit.

Arvestades selle traditsioonilist kasutust, on tõenäoline, et S. aureal võib olla samaaegne seene- ja põletikuvastane toime. Neid omadusi on aga testitud piiratud arvu uuringutega kitsal hulgal mikroorganismidel [32–34]. Veelgi enam, meie teadmiste kohaselt ei ole seni üheski uuringus teatatud S. aureuse haavade paranemisomadustest. Seetõttu on selle töö eesmärk iseloomustada S. aureus'e (sandsalie) eeterlikku õli, kui see on kodustatud Sardiinia saare rannikualal. Arvestades õlide erinevusi hooajal ja asukohas, valiti see territoorium selle sarnasuse tõttu Lõuna-Aafrika Fynbose ökoregiooniga, S. aurea koduterritooriumiga [35,36]. Lisaks kinnitasime mõned sellele liigile omistatud traditsioonilised kasutusviisid, eriti need, mis on seotud antimikroobsete, põletikuvastaste ja haavade paranemisega. Avaldati ka vananemisvastased toimed, et suurendada huvi selle taime vastu.

2. Tulemused

2.1. S. aurea eeterliku õli keemiline koostis

S. aurea lehed allutati hüdrodestilleerimisele, saades eeterliku õli (EO) saagisega 0,54% (w/w). Tabelis 1 on EO-ga identifitseeritud ühendid ja nende suhtelised protsendid loetletud elueerimise järjekorras. Tuvastati 36 ühendit, kokku 98,8 protsenti.

Lisaks on 47,4 protsenti ühenditest hapnikuga rikastatud monoterpeenid, 28,8 protsenti süsivesinikmonoterpeenid, 19,8 protsenti süsivesinike seskviterpeenid ja 2,8 protsenti hapnikurikkad seskviterpeenid.

Keemiline analüüs näitas, et S. aurea õli kõige tüüpilisemad komponendid olid 1,8 tsineool (16,7 protsenti), -pineen (11,9 protsenti), cis-tujoon (10,5 protsenti), kamper (9,5 protsenti), ( E)-karüofüleen (9,3 protsenti), trans-tujoon (6,9 protsenti), -pineen (4,7 protsenti), kamfeen (3,9 protsenti) ja -humuleen (3,0 protsenti).

2.2. Salvia aurea seenevastane toime

Seenevastase toime hindamiseks kasutati mikrolahjenduspuljongi meetodit, nagu on kirjeldatud tabelis 2. Trichophyton mentagrophytes, T. rubrum ja Epidermophyton floccosum on EO aktiivsuse suhtes kõige tundlikumad tüved. Täpsemalt näitas EO fungitsiidset toimet T. mentagrophytes'e ja E. floccosumi suhtes.

2.3. S. aurea põletikuvastane potentsiaal

S. aurea põletikuvastase potentsiaali hindamiseks kasutasime lipopolüsahhariidiga (LPS) stimuleeritud makrofaagide mudelit. Ootuspäraselt vabastasid makrofaagid LPS-i juuresolekul NO söötmesse, kus see tuvastati nitraadina ([NO]=43,03 ± 7,74 µM). Huvitaval kombel vähendas S. aurea EO LPS-i tekitatud NO vabanemist annusest sõltuvalt (joonis 1A, IC50=1.07 µL/mL). Alusmehhanismide paljastamiseks valiti annus 1,25 µL/ml, kuna see inhibeeris NO tootmist rohkem kui 50 protsenti, ei olnud toksilisus (joonis 1B) ja oli annus, mis pärssis dermatofüütide kasvu.

LPS-i seondumine Toll-sarnase retseptoriga 4 (TLR4) käivitab NF-κB tuuma translokatsiooni, mis põhjustab indutseeritava lämmastikoksiidi süntaasi (Nos2) ja tsüklooksügenaasi -2 (Ptgs2) [39] ekspressiooni. Seejärel hindasime, kas EO võib potentsiaalselt reguleerida nende valkude taset. Ootuspäraselt täheldati LPS-iga töödeldud makrofaagides nii iNOS-i kui ka COX-2 valgutaseme tõusu (joonis 2A–C). S. aurea eeterliku õli olemasolu annuses 1,25 µL/mL võib viia mõlema valgu, eriti iNOS-i valgutaseme olulise languseni. Need tulemused viitavad sellele, et eeterlik õli võib moduleerida NF-κB rada.

2.4. S. aurea eeterliku õli haavade paranemise omadused

Arvestades S. aurea kasutamist haavaravis [18], püstitasime hüpoteesi, et eeterlik õli võib parandada haavade paranemist. Tõepoolest, meie tulemused näitavad, et EO soodustas rakkude migratsiooni (joonis 3A, B), mõjutamata rakkude elujõulisust (joonis 3C).

2.5. S. aurea eeterliku õli vananemisvastane potentsiaal

Pidades meeles, et S. aurea traditsioonilised kasutusviisid on seotud vanusega seotud haiguste raviga [40], hindasime mõju rakkude vananemisele. Kasutades etoposiidist põhjustatud rakkude vananemist, täheldasime vananemisega seotud galaktosidaasi aktiivsust (joonis 4A, B). Huvitav on see, et eeterliku õli lisamisel taastumisfaasis see omadus vähenes, mis viitab sellele, et eeterlik õli näis takistavat rakkude vananemist.

3. Arutelu

See uuring annab Sardiinia saarel kodustatud S. aurea eeterlike õlide profiili. Teatasime, et selle EO-d iseloomustasid 47,4 protsenti hapnikuga rikastatud monoterpeenid, peamiselt 1,8-tsineool, cis/trans-tujoon ja kamper, 28,8 protsenti süsivesinike monoterpeenid, peamiselt -pineen, ja 19,8 protsenti süsivesinike seskviterpeenid, (E)-karüofüleeni ja -humuleeniga, samas kui hapnikuga küllastunud seskviterpeenidest ainult 2,8 protsenti.

Võrreldes kirjandusega, ilmneb selge kvalitatiivne ja kvantitatiivne erinevus looduslike S. aurea EOde koostises. Eelkõige olid peamised teatatud komponendid -pineen, mütseen, o-tsümeen, spatulenool ja -eudesmol [32]. Lisaks kajastuvad need muutused põhiliste ühendite klasside suhtelistes protsentides. Siin avastasime hapnikuga rikastatud seskviterpeenide olulise vähenemise (2,8 protsenti), samas kui kahes erinevas Lääne-Kapimaa piirkonna uuringus olid need 18,9 protsenti ja 41,7 protsenti[33,41].

Kuid see keemiline erinevus ei olnud ootamatu, kuna mõnede autorite arvates ei olnud see keemiline erinevus ootamatu, kuna mõnede autorite arvates ei sõltu see mitte ainult geneetilistest omadustest, vaid ka taime elutsüklist, kasvuperioodist, koristushooajast. , mullaomadused ja stressitekitajad[32, 41]

Eelkõige S. aurea puhul leiti ühtlane keemiline mitmekesisus vastavalt hooajalisusele ja saagikoristuse territooriumile [32,41]. Lim Ah Tock jt, 2020, käsitlesid Lääne-Kapimaa piirkonna populatsioone ja näitasid suurt liigisisest varieeruvust, moodustades 47,8 protsenti [32,33,41]. Lisaks analüüsisid nad nende populatsioonide HCA dendrogrammi, kus S. aureas ilmnes selge klastrite eraldumine, mis vastutab olulise keemilise variatsiooni eest [41].

Lisaks nimetatud teguritele, mis mõjutavad EO keemilist koostist, on teada, et koristusjärgne töötlemine, hoiutingimused ja ekstraheerimismeetodid mõjutavad ka keemilist varieeruvust [42,43]. Seda silmas pidades võivad siin täheldatud erinevused olla tingitud mõnest neist teguritest.

Teatatud bioloogilised aktiivsused kinnitavad S. aurea traditsioonilisi kasutusomadusi, eriti neid, mis on seotud põletikuliste ja mikroobsete infektsioonidega.

Teatame, et EO pärssis dermatofüütide kasvu, kinnitades seega nahahaiguste raviks ettenähtud kasutamist [18]. S. aurea eeterlik õli on teadaolevalt tõhus Brevibacterium [44], Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Bacillus cereus ja Escherichia coli [32,33] vastu. Teised uuringud teatasid mittelenduvate ekstraktide antimikroobsest toimest [14, 45, 46]. Seoses peamiste S. aurea EO-ga leitud ühenditega teatati, et 1,8-tsineoolil oli nõrk aktiivsus testitud dermatofüütide suhtes [47]. Taimepatogeenide pärssimisest teatati ka 1,{11}}tsineooli [48–51] puhul. Pineeni antimikroobsest potentsiaalist teatati laialdaselt ka mitmete pärm- ja niitseente, sealhulgas Trichophyton spp. [52–56]. Tsis-tujoon, selle eeterliku õli oluline ühend, avaldas ka antimikroobset toimet [57,58]. Teisest küljest teatati kampri nõrgast antimikroobsest toimest [59–61]. Seskviterpeen-karüofüleen avaldas antimikroobset toimet erinevate seente ja bakterite vastu [3, 62–64]. Need tulemused viitavad sellele, et -pineen, cis-tujoon ja -karüofüleen võivad olla peamised S. aurea aktiivsuse soodustajad.

S. aurea traditsioonilise kasutamise tõttu põletikuliste haiguste ravis [18] püüdsime neid toimeid kinnitada. Tõepoolest, meie tulemused näitavad, et EO pärssis NO tootmist LPS-i poolt stimuleeritud makrofaagides ja vähendas samaaegselt iNOS-i ja COX-i -2 valgu taset: kaks põletikulist reaktsiooni soodustavat ensüümi. Meie teadmiste kohaselt käsitles ainult üks uuring S. aurea põletikuvastast potentsiaali, näidates lipoksügenaasi-5 aktiivsust inhibeerivat võimet [33]. Seoses isoleeritud ühenditega teatasid mitmed uuringud 1,{10}}tsineooli põletikuvastasest toimest [65–70], sealhulgas kliinilistes uuringutes [71]. Lisaks on teada, et see ühend inhibeerib COX-2 aktiivsust [66] ja takistab NF-κB tuuma translokatsiooni [65,72]. -pineen vähendas oluliselt NO tootmist nii LPS-ga stimuleeritud makrofaagides [73] kui ka IL-1 -aktiveeritud kondrotsüütides [74]. Samuti näitas see kemotaksise pärssimist neutrofiilides [75]. Kampori põletikuvastast potentsiaali on laialdaselt kirjeldatud, kasutades nii in vivo kui ka in vitro mudeleid [76–78]. -Karüofüleen avaldas loommudelites põletikuvastast toimet ka koliidi [79], nahahaavade ekstsisioonide [80] ja sepsise [81] korral. Teised in vitro ja in vivo lähenemisviisid rõhutavad selle seskviterpeeni põletikuvastast toimet [82, 83]. Tulemused viitavad sellele, et S. aurea puhul täheldatud aktiivsus võib olla tingitud nende ühendite olemasolust, mis võivad toimida sünergistlikult.

Teatasime, et S. aurea eeterlik õli soodustas haavade paranemist, mis kinnitas selle kasutamist lahtiste haavade raviks. Meie teadmiste kohaselt ei ole üheski uuringus kirjeldatud S. aurea haavade paranemise omadusi. Mis puutub isoleeritud ühenditesse, siis 1,8-tsineool soodustab rakkude migratsiooni haavamudelites nii in vivo kui ka in vitro [70, 84, 85]. Lisaks teatati, et eeterlik õli Teucrium polium subsp. kapitalism, rikas -pineeni, haavade paranemise paranemine [86]. Seskviterpeen-karüofüleen soodustas haavade paranemist ka nahahaava ekstsisioonimudelis [80]. Sellegipoolest võivad teatatud aktiivsusele kaasa aidata ka teised väiksemates kogustes leitud ühendid. Tõepoolest, -pineen soodustab haavade paranemist avatud haava loommudelis [84]. Arvestades, et eeterlikud õlid on keerulised segud, on mõeldav, et teatatud haavade paranemise omadused võivad olla tingitud mitmete ühendite sünergilisest mõjust.

Esitame esimest korda S. aurea eeterliku õli vananemisvastase toime. Tõepoolest, eeterliku õliga töödeldud rakkudes oli vähenenud vananemisega seotud galaktosidaasi-positiivsete rakkude arv. Isoleeritud ühendite puhul oli nende mõju avaldanud uuringute arv vähe. Tõepoolest, kamper takistab vananemisega seotud galaktosidaasi suurenenud aktiivsust [87]. Teisest küljest indutseeris 1,8-tsineool, selle eeterliku õli peamine ühend, rakkude vananemist [88]. Arvestades uuringute vähesust, võime vaid oletada, et teatatud aktiivsus võib olla tingitud peamiselt kampriühendist; väiksemate ühendite mõju ei saa siiski kõrvale jätta.

【Lisateabe saamiseks: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】