Edusammud dermatoloogias, kasutades DNA aptameeri "Aptamin C" uuendust: oksüdatiivse stressi ennetamine ja C-vitamiini mõju maksimeerimine antioksüdatsiooni kaudu

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Abstraktne

Taust:C-vitamiin(tuntud ka kui L-askorbiinhape) mängib olulist rolli reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) vähendamisel ja rakkude regenereerimisel, kaitstes rakke oksüdatiivse stressi eest. Kuigi C-vitamiini kasutatakse laialdaselt kosmeetika- ja terapeutilistel turgudel, on märkimisväärseid tõendeid selle kohta, et C-vitamiin imendub kergestioksüdatsioonsäilitamisel õhu, pH, temperatuuri ja UV-kiirguse mõjul. See C-vitamiini puudus vähendab selle antioksüdandina toimimist ja vähendab C-vitamiini sisaldavate toodete säilivusaega. C-vitamiini vaeguse ületamiseks oleme välja töötanud Aptamin C, uuendusliku DNA aptameeri, mis maksimeerib C-vitamiini antioksüdantset efektiivsust, seondudes C-vitamiini redutseeritud vormiga ja aeglustab selle toimet.oksüdatsioon.

Meetodid:Aptamiin C seondumine C-vitamiiniga määrati ITC analüüsi abil. ITC katse viidi läbi 0,2 mmol/LC-vitamiinmis süstiti 25 korda 2 µL alikvootidena 1,8 ml proovirakku, mis sisaldas Aptamiin C kontsentratsioonis 0.02 mmol/L. Andmed sobitati ühe saidi sidumisisotermiga, kasutades ITC v.5.0 lähteprogrammi.

Tulemused:Aptamin C toime uurimiseks jaC-vitamiininimese nahas, viidi läbi nii in vitro kui ka kliinilised testid. Täheldasime, et Aptamin C ja C-vitamiini kompleks oli märkimisväärselt tõhus kortsude parandamisel, valgendaval toimel ja hüdratatsiooni suurendamisel. Kliinilises testis ilmnes kompleksiga ravitud isikutel nahaärrituse ja sügeluse dramaatiline paranemine. Katses ei ilmnenud Aptamin C kompleksi kõrvaltoimeid.

Järeldus:Kokkuvõttes näitasid need tulemused, et Aptamin C, uuenduslik uudne ühend, peaks potentsiaalselt serveerima peamise kosmeetilise koostisainena mitmesuguste nahahaiguste korral.

MÄRKSÕNADantioksüdatsioon, aptamiin C (C-vitamiini siduv Aptamer),oksüdatsioon, oksüdatiivne stress,C-vitamiin(L-askorbiinhape)

flavonoid---anti-oxidation

cistancheneil on tugev antioksüdatsioonivõime

1|SISSEJUHATUS

Reaktiivsed hapniku liigid (ROS) on keemiliselt reaktiivsed kemikaalid, mis sisaldavad hapnikku, mis mängib olulist rolli rakkude signaaliülekandes ja homöostaasis.{0}} Need ei hõlma mitte ainult positiivseid mõjusid, nagu peremeesorganismi kaitsegeenide indutseerimine ja ioonide transpordisüsteemide mobiliseerimine, vaid mängib rolli ka apoptoosis (programmeeritud rakusurm).4,5ROS-i taset võib tõsta keskkonnastress, mis põhjustab rakustruktuuride kahjustusi.3 Seda nähtust nimetatakse "oksüdatiivseks stressiks". Oksüdatiivne stress on erinevate haiguste, sealhulgas neurodegeneratiivsete haiguste, Lou Gehrigi tõve, autismi, hulgiskleroosi ja nahahaiguste üks peamisi põhjuseid.{4}} Lisaks mõjutab oksüdatiivne stress otseselt naha vananemisprotsessi16; valgud, lipiidid ja DNA reageerivad tundlikult oksüdatiivsele stressile, mis on põhjustatud ROS-ist.17 Antioksüdandid on naha kaitsmisel väga tõhusad, kuna reageerivad otse ROS-ile, takistades neil jõuda bioloogiliste sihtmolekulideni.18,19 Antioksüdandid nagu näiteksC-vitamiin, E-vitamiin, koensüüm Q10 ja polüfenoolsed ühendid kaitsevad nahka ROS-i põhjustatud kahjustuste eest. Antioksüdandid aitavad seeläbi ära hoida ja ravida erinevaid nahahaigusi ning aeglustada naha vananemisprotsesse.20 C-vitamiini kasutamine tööstuses tuleneb eelkõige selle antioksüdeerivatest omadustest, mis tulenevadC-vitamiinselle võime neutraliseerida vabu hapnikuradikaale protsessi kaudu, mida nimetatakse radikaalide eemaldamiseks.21,22 Kuid nende samade antioksüdantsete omaduste tõttu on molekul ise oma olemuselt vastuvõtlik lagunemisele.oksüdatsioon. Selle probleemi lahendamiseks töötasime välja Aptamin C, DNA aptameeri, mis seondub spetsiifiliselt C-vitamiiniga ja inhibeerib C-vitamiini oksüdatsiooni. Aptameerid on üheahelalised DNA- või RNA-põhised oligonukleotiidid, mis on võimelised selektiivselt siduma paljusid molekule. Aptameerid identifitseeritakse tavaliselt in vitro selektsioonimeetodiga, mida nimetatakse ligandide süstemaatiliseks arenguks eksponentsiaalse rikastamise teel või "SELEX". Me tuvastasime, et Aptamiin C inhibeeriboksüdatsioonC-vitamiini mitmetest oksüdeerivatest ainetest ja säilitab antioksüdantse aktiivsuse pikaajalise säilitamise ajal. Aptamiin C ohutushinnangu kinnitamiseks viidi läbi katsed raku tasandil ja neid rakendati otse inimestele ning toksilisust ei täheldatud. Nahahaigused, nagu atoopiline dermatiit, psoriaas ja akne, on seotud immuunvastuse ja ROS-iga.23C-vitamiinon võimeline eemaldama ROS-i ja sellel on põletikuvastane toime.24 Aptamiin C takistaboksüdatsioonc-vitamiini ja suurendab selle tõhusust aeglase vabanemise kaudu. Seetõttu eeldame, et Aptamin C-vitamiini C kompleksil on sünergiline toime.

2|MATERJALID JA MEETODID

2.1|Aptameeri sõeluuring C-vitamiini suhtes vähendatud grafeenoksiidiga

See meetod on läbi viidud, muutes eelmise uurimistöö meetodit.25 ssDNA kandidaadid, mis võivad spetsiifiliselt seondudaC-vitamiintöötati välja juhuslikust ssDNA raamatukogust, mis koosnes umbes 1X1018 erinevast järjestusest. ssDNA raamatukogu jaoks kasutasime kohandatud järjestust, mille suurus on 60 meeri ja mis sisaldab 30 juhuslikult genereeritud nukleotiidjärjestust ja amplifikatsiooni praimeri saiti (5'-ATGCGGATCCCGCGC-(N)30-GCGCGAAGCTTGCGC-3). Tegime kokku viis ringi, muutes samal ajal katsetingimusi, et valida täpsem järjestus. Reaktsiooni kogumaht oli 200 µl. Umbes 20 μL 10 × sidumispuhvrit (10 × PBS-i, millele on lisatud 10 mmol/L MgCl2), 80 μL rGO-d (5 mg/ml, lahjendatud vees) ja 200 pikomooli ssDNA raamatukogu (20 μl 100 μmol/L põhivara) ) lisati ja viidi dH2O 200 μL-ni. Reaktsioon kestis 30 minutit, et siduda ssDNA raamatukogu rGO-ga, ja seejärel tsentrifuugiti segu 20 000 g juures 20 minutit, et eemaldada supernatant. RGO pelletit pesti üks kord 200 μL sidumispuhvriga, mis on sama kontsentratsioon kui iga vooru sihtmärgi sidumistingimus. Kandidaatide elueerimiseks kasutatakse 200 nanomooliC-vitamiinrGO pelletile lisati 200 μL sidumispuhvrit ja elueerimisetapp kestis 1 tund. Elueeritud ssDNA jagati tsentrifuugimisega, seda tehti 20 000 g juures 20 minutit ja amplifitseeriti. Enne amplifikatsiooni tegime lisandite, välja arvatud ssDNA, eemaldamiseks EtOH-sadestamise. Amplifitseeritud ssDNA saamiseks tegime asümmeetrilise PCR. Asümmeetrilise PCR edasisuunava praimeri ja pöördpraimeri suhe oli 10:1. Tegime elektroforeesi 2,5-protsendilisel agaroosgeelil, et kinnitada PCR-produkti mõne mikroliitriga. Asümmeetriline PCR ei saa toota ainult ssDNA-d. Niisiis kasutasime ssDNA kandidaatide isoleerimiseks purustamise ja leotamise meetodit. Meetodi jaoks tegime elektroforeesi 12% polüakrüülamiidi natiivsel geelil ja värvisime geeli etiidiumbromiidiga (EtBr). Kaheahelalise DNA (dsDNA) ja ssDNA eraldamiseks lõigati ssDNA-ga värvitud geeli osa välja, pulbristati ja ekstraheeriti ssDNA purustamis- ja leotuspuhvriga (500 mmol/L NH4OAc, 0,1 protsenti SDS, 0,1 mmol/l EDTA). üle öö. Peenestatud geel eraldati tsentrifuugimisega. SsDNA-d sisaldav supernatant kontsentreeritakse ja puhastatakse EtOH-sadestamise teel. Kuivatatud ssDNA koguti steriliseeritud dH2O-ga ja seda kasutati järgmises voorus raamatukoguna.

looduslikud koostisosadcistanche amazon

2.2|Isotermilise tiitrimise kalorimeetria (ITC) katse

Isotermilise tiitrimise kalorimeetria katse viidi läbi, kasutades VP-ITC süsteemi (MicroCal Inc Northampton) 25 kraadi juures fosfaatpuhvri soolalahuses, mis koosnes 1 mmol/l magneesiumkloriidist (pH 7,4). Enne iga tiitrimiskatset lisatakse Aptamin C 2 ml jaC-vitamiin600 µl proovi degaseeriti 30 minutit vaakumis, segamata, temperatuuril, mis oli paar kraadi madalam kui katses. Valmistasime 0,2 mmol/L C-vitamiini, mida süstiti 25 korda 2 µL alikvootidena 1,8 ml proovirakku, mis sisaldas Aptamin C kontsentratsioonis 0,02 mmol/L. Andmed sobitati ühe saidi sidumisisotermiga, kasutades ITC v.5.0 (MicroCal Inc) lähteprogrammi.

2,3|Fluorestsentsipõhised mikroplaadi testid C-vitamiini oksüdatsiooni jaoks

OksüdatsioonkohtaC-vitamiinmõõdeti oksüdeeritud toote dehüdroaskorbaadi (DHA) tuvastamisega, kasutades Visliseli jt kirjeldatud meetodi modifitseeritud versiooni.7 Selle meetodi puhul tuvastatakse DHA reaktsioonil o-fenüleendiamiiniga (OPDA), et moodustada fluorestseeruv kondensatsiooniprodukt 3‐( dihüdroksüetüül)furo[3,4-b]kinoksaliin-1-oon. Analüüs viidi läbi järgmiselt mustadel 384-süvendilistel plaatidel (Greiner Bio‐One). Aptameerid lahustati esmalt fosfaatpuhverdatud soolalahuses, pH 7,2, mis sisaldas 1 mM MgCl2, kontsentratsiooniga 200 µmol/L, seejärel volditi kuumutades 95 kraadini ja lasti aeglaselt jahtuda toatemperatuurini 15 minutit. Volditud aptameerid lahjendati seejärel vahekorras 1:1 (v:v) värskelt valmistatud lahuseks 5 mmol/l.C-vitamiinanalüüsipuhvris [50 mmol/L naatriumatsetaat, 1% (mass/maht) BSA, 0,05% (maht/maht) Tween 20, 1 mM MgCl2 (Sigma, kõik komponendid) reguleeritud pH väärtusele 5,5] ja segu inkubeeriti 30 minutit toatemperatuuril, et lasta aptameeridel enne oksüdeerija lisamist seonduda. Seejärel lisati C-vitamiini/aptameeri lahustele oksüdeerijad (EM) H2O2 (Sigma) kontsentratsioonides. Oksüdeerijad lahjendati eelnevalt nende töökontsentratsioonini analüüsipuhvris. Seejärel inkubeeriti proove toatemperatuuril 10 minutit enne OPDA (Sigma) lisamist kontsentratsioonil 5,5 mmol/l analüüsipuhvris. Vahetult pärast OPDA lisamist määrati proovide fluorestsents 425 nm juures, kasutades SpectraMax® i3X plaadilugejat (Molecular Devices), ergastusega 345 nm juures, 45-minutilise aja jooksul, mõõtmisi tehti iga 60 sekundi järel. Kõik proovid ja reaktiivi sisaldavad anumad mähiti fooliumisse, et kaitsta neid valguse eest kõigi fluorestsentsanalüüside jaoks tehtud inkubatsioonide ajal.

2.4|C-vitamiini vähenemise mõõtmine DCPIP (2,6-diklorofenolindofenool) abil

Vähendamise kindlaksmääramiseksC-vitamiin, viisime katsed läbi DCPIP reaktsiooni abil. C-vitamiin reageerib DCPIP-ga, muutes värvi sinisest värvituks. Valmistatud C-vitamiini töödeldi 5% Aptamin CTM-iga ja töötlemata C-vitamiini inkubeeriti toatemperatuuril 8 nädalat. Proovi mõõdeti 2, 4 ja 8 nädala pärast. Koonilisse kolbi lisati pipetiga umbes 2 ml DCPIP-i ja esimest töötlemata C-vitamiini, kuni lahus muutus värvituks. SummaC-vitamiinlisatud mõõdeti ja korrati teiste proovidega. Nende andmete põhjal arvutati iga proovi vähenemise aste.

2,5|In vitro uuring inimese naha fibroblastide kortsudevastase toime kohta

Rakkude elujõulisuse hindamiseks inimese dermaalsetes fibroblastides töödeldi rakke erinevate lõppkontsentratsioonidega Aptamin C-ga.C-vitamiin(Aptamiin C ug pluss C-vitamiin ug/mL) {{0}}.01 pluss 0,5 ug/mL, 0,1 pluss 5 ug/mL, 0,5 pluss 25 ug/ml /mL, 1 pluss 50 ug/ml ja 2 pluss 100 ug/ml. Seejärel töödeldi rakke aptamiin C kontsentratsioonides C-vitamiiniga, et tuvastada rakusisese kollageeni, rakusisese kollagenaasi (MMP-1) ja elastaasi aktiivsust.

Inimese naha fibroblastid (HDF-id) valiti MFDS-i "Funktsionaalse kosmeetika (ΙI) efektiivsuse hindamise juhiste" alusel. HDF-e kultiveeriti kõrge glükoosisisaldusega DMEM/F12 3:1 segus, millele oli lisatud 10% FBS-i ja 1% Antibiootikum-antimükootilist ainet, niisutatud 5% CO2 atmosfääris temperatuuril 37 ˚C.

HDF-id (5 × 104 rakku süvendi kohta) külvati 24 süvendiga plaatidele ja inkubeeriti 24 tundi ning töödeldi erinevate kontsentratsioonidega Aptamin C-ga.C-vitamiinja inkubeeriti 24 tundi. 24 tunni pärast koguti supernatant ja söötmesse vabanenud prokollageeni kogus mõõdeti 450 nm juures, kasutades Procollagen Type IC-Peptide (PIP) ELISA komplekti. Kollageeni tootmise aste kalibreeriti valgu üldsisalduse järgi ja võrreldi positiivse kontrollina TGF-1-ga. Lahustikontrollina kasutati ilma katsematerjalideta söödet.

HDF-id (5 × 104 rakku süvendi kohta) külvati 24 süvendiga plaatidele ja inkubeeriti 24 tundi ning töödeldi erinevate kontsentratsioonidega Aptamin C-ga.C-vitamiinja inkubeeriti 48 tundi. 48 tunni pärast mõõdeti kollagenaasi aktiivsust 450 nm juures, kasutades MMP-1 Human ELISA komplekti. MMP-1 aktiivsust hinnati valgu üldsisalduse järgi ja võrreldi positiivse kontrollina TGF-1-ga. Lahustikontrollina kasutati ilma katsematerjalideta söödet.

Kõik andmed väljendati keskmise ± standardhälbena ja need saadi kolmest sõltumatust katsest. Statistiline analüüs viidi läbi sõltumatute proovide t-testiga, kasutades SPSS® tarkvaraprogrammi (IBM) olulisuse tasemel P <>

2,6|Naha kortsude mõõtmine 3D kujutise analüüsisüsteemiga

Selles uuringus osales 22 naist (keskmine vanus: 50,05 ± 2,94 aastat). Varesjalgade nahakortse hinnati 3D-kujutise analüüsisüsteemiga algtasemel, 4. ja 8. nädalal. Naha hüdratatsiooni hinnati mahtuvusmeetodil ja TEWL-i nahapinna vee difusioonimeetodil ja naha elastsust imemismeetodil hinnati algtasemel, 2, 4 ja 8 nädalat pärast ravi. Samuti täitsid katsealused 2. ja 4. ja 8. nädalal efektiivsuse kohta eneseküsimustikud ning 8. nädalal pärast ravi katsealused kasutatavuse kohta. Kõiki saadud andmeid analüüsiti statistiliselt SPSS® tarkvaraga. Varesjalgade kortsude parameetreid hinnati PRIMOS® Premiumi (GFMesstechnik GmbH) abil. See süsteem võimaldas kvantitatiivselt analüüsida nahal väljaulatuvate kortsude karedust, sügavust, pindala ja mahtu. Pilti analüüsiti samas piirkonnas naha kortsude parameetrite järgi (1, kortsude keskmine sügavus; 2, suurim sügavus; 3, suurim sügavus; 4, kortsude kogupindala; 5, kortsude kogumaht; 6 , Kortsude koguarv; 7, Kortsude kogupikkus; 8, Ra; 9, Ry; ja 10, Rz) algtasemel, 4 ja 8 nädalat pärast ravi Primos 5.8 E ver. Tarkvara.

3|TULEMUSED

3.1|RGO-SELEXi edukaks teostamiseks ebastabiilse sihtmärgiga oli vaja ranget lähenemist puhvri ettevalmistamisele.

SsDNA raamatukogu, mis oli seotud rGO-ga π‐π virnastamise interaktsioonide kaudu grafeenipinna aromaatsete tsüklite ja DNA aluste 26, 27 ja rGO-l seondumata ssDNA vahel, eraldati ja eemaldati tsentrifuugimisega. rGO pinnale adsorbeeritud ssDNA elueeriti läbi sihtühendiga töötlemise. Kirjanduse aruannete kohaselt muutub aptameeri konformatsioon pärast sidumist sihtmärgiga ja nõrgendades π‐π virnastamisinteraktsioone rGO-ga.28-31 Seda protsessi korrati viis ringi. Iga järgmine ring kulges karmimate puhvertingimuste ja lühemate elueerimisaegadega. See jõudlus võimaldas meil säilitada ssDNA parema spetsiifilisusega sihtühendite suhtes.

RGO-SELEX protsessiga toodetud rikastatud raamatukogu NGS-andmed andsid 404071 järjestust. Valisime nendest andmetest 119 järjestust, sorteerisime need struktuuri sarnasuse alusel 11 rühma ja valisime aptameerikandidaatide jaoks tüüpilised järjestused (joonis 1A).

Selection of aptamers capable of binding vitamin C. A, The general scheme of the SELEX method using DNA. B, Representative image of each aptamer group

3.2|Aptamiin C valimine

Aptamin C kandidaatide sekundaarsed struktuurid ennustati M-Foldi vaba tarkvara abil.32,33 Kandidaadid rühmitati nende asukoha, pikkuse, kuju ning suurima potentsiaaliga struktuuri varre ja silmuse arvu järgi (joonis 1B). DHA, oksiidC-vitamiin, tuvastatakse selle reaktsioonil o-fenüleendiamiiniga (OPDA), mis mängib indikaatori rolli.34 Kui aptameer seondub ja takistab selleoksüdatsioonC-vitamiiniks ja takistab selle oksüdeerumist, on C-vitamiini ja OPDA kondensatsiooniprodukti 3-(dihüdroksüetüül)-furo-[3,4-b]-kinoksaliin-1-ooni fluorestsentssignaal madalam kui aptameerita kontroll. Graafik iga kandidaataptameeri kohta, mis on segatud C-vitamiini ja oksüdeerijaga, koos positiivsete kontrollidega,C-vitamiinpluss oksüdeerija ja segamisjärjestused, mis on segatud C-vitamiini ja oksüdeerijaga (joonis 1C). Viiel aptameeril, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg ja Ck, on antioksüdatiivne toime.

Inhibition of vitamin C oxidation by Aptamin C. A, Isothermal calorimetry

3,3|C-vitamiini oksüdatsiooni pärssimine aptamiin C poolt

Aptamiin C-l on kõrge seondumisafiinsusC-vitamiin. Aptamiin C seondumine C-vitamiiniga määrati ITC analüüsi abil. Seondumisisotermi põhjal saab saada sidumisreaktsiooni entalpia (ΔH), entroopia (ΔS) ja stöhhiomeetria (n). Aptamiini Cb eksotermiline seondumine tuvastati ITC mõõtmisel ja entalpia (ΔH) arvutati 302,5 ± 3,788, entroopia (ΔS) arvutati 18,9, stöhhiomeetria (n) arvutati 56,7 ± {{21 }},426 ja dissotsiatsioonikonstandid (Kd) arvutati C-vitamiini jaoks 2,13 uM. Aptamin Cf eksotermiline seondumine tuvastati ITC mõõtmisel ja entalpia (ΔH) arvutati väärtuseks 279,2 ± 2,992, arvutati entroopia (ΔS). kui 18,4, arvutati stöhhiomeetria (n) väärtuseks 167 ± 1,15 ja dissotsiatsioonikonstandid (Kd) arvutati kui 0,89 uM C-vitamiini jaoks. Aptamiin Ck eksotermiline seondumine tuvastati ITC mõõtmise ja entalpia (ΔH) põhjal. ) arvutati 250,4 ± 3,742, entroopia (ΔS) arvutati 19,8, stöhhiomeetria (n) arvutati 82,2 ± 0,732 ja dissotsiatsioonikonstandid (Kd) arvutati 0,90 µmol/L. C-vitamiin (joonis 2A). ITC mõõtmised näitavad, et entroopia muutus seoses Aptamin C-ga on peamine liikumapanev jõudC-vitamiin. EnnetamaoksüdatsioonC-vitamiini vedelas olekus valmistati kõik lahused lämmastikuga töödeldud deioniseeritud veega. Fluorestsentsi väljendati ja analüüsiti kvantitatiivselt, kui OPDA (o-fenüleendiamiin) seostus DHA-ga, mille tekitasoksüdatsioonC-vitamiini oksüdatsiooniastet vastavalt aptamiin C kontsentratsioonile (125, 250, 500 ja 1000 nmol/L) võrreldi ja kinnitati OPDA analüüsiga. Tulemused näitasid, etC-vitamiinkonversioon dehüdroaskorbiinhappeks oli aeglasem, kui Aptamin C kontsentratsioon oli kõrgem. (Joonis 2B). Need andmed näitavad, et Aptamiin C on annusest sõltuv C-vitamiini oksüdatsiooni inhibiitor.

Tegime katseid, et teha kindlaks, kas Aptamin C võib ära hoidaoksüdatsioonC-vitamiini pika aja jooksul. Aptamiin C-ga samaaegselt ravitudC-vitamiin, ja töötlemata C-vitamiini eksponeeriti valguse kätte ja lasti 8 nädalat toatemperatuuril seista. Selle tulemusena, kui ravimata C-vitamiin jäeti üksi, vähenes vähenemise määr 2 nädalaga alla poole ja peaaegu kõik need oksüdeerusid 4 nädala pärast. Aptamiin C juuresolekul vähenes C-vitamiini sisaldus umbes poole võrra 8 nädalani (joonis 2C). See viitab sellele, et Aptamin C takistab C-vitamiini oksüdeerumist pika aja jooksul.

cistanche whitening effect on skin to anti-oxidation

cistanche kulturism

3,4|Intratsellulaarse kollagenaasi (MMP-1) aktiivsuse ja kollageeni analüüs

Kollagenaasi aktiivsuse analüüsi põhjal vähenes maatriksi metalloproteinaas-1 (MMP-1) tootmine annusest sõltuval viisil 7.06 protsenti, 9,29 protsenti ja 31,81 protsenti kontsentratsioonidel {{1{ {12}}}}.01 pluss 0.5 ug/mL, 0.1 pluss 5 ug/mL ja 0.5 pluss 25 ug/ ml, vastavalt (joonis 3A). Kollageeni sünteesi analüüsimisel suurenes prokollageeni tüüpi Ι karboksü-terminaalse peptiidi (PIP) tase annusest sõltuval viisil 25.{{20}} protsendi võrra 0,01 pluss 0,5 ug/ml 41,99 protsenti 0,1 pluss 5 ug/ml ja 71,18 protsenti 0,5 pluss 25 ug/ml juures (joonis 3B).

Figure 3+Figure 4

3,5|Kliiniline uuring naha kortsude parandamise mõjust inimese nahale

Kortsude parameetrite statistiline analüüs viidi läbi 3D kujutise analüüsisüsteemiga, et hinnata testtoote naha kortse parandavat mõju inimese nahale. Võrreldes kontrollrühmaga vähenes parameeter "Keskmine kortsude sügavus" 4 nädalaga 4,77 protsenti ja 8 nädalaga 4,25 protsenti, parameeter "Suurima kortsu keskmine sügavus" vähenes 4 nädalaga 3,37 protsenti ja 8 nädalaga 4,53 protsenti. Maksimaalse sügavuse suurima kortsu parameeter vähenes 4 nädala pärast 4,36 protsenti ja 8 nädala pärast 7,19 protsenti, parameeter „Kortsude kogupikkus“ vähenes 4 nädala pärast 1,61 protsenti ja 8 nädala pärast 2,67 protsenti, parameetrit „Ra“ vähendati 4,22 protsenti 4 nädala pärast ja 3,90 protsenti 8 nädala pärast vähendati parameetrit "Ry" 2,66% 4 nädala pärast ja 7,11% 8 nädala pärast, parameetrit "Rz" vähendati 3,69% 4 nädala pärast ja 6,22% 8 nädala pärast, vähenemine oli 3,69 protsenti –7,11 protsenti (joonis 4).

4|KOKKUVÕTE

C-vitamiinon kaubanduslikult oluline, kuid ebastabiilne molekul, mistõttu selle stabiilsuse parandamine pakub huvi erinevatele turusektoritele. Meie töö näitab, et aptamiin C, DNA aptameerid, pikendab potentsiaalselt säilivusaega ja suurendab selliste toodete tugevust, viivitades.C-vitamiin oksüdatsioonlahuses. Näitasime Aptamin C kompleksi kliinilist efektiivsust kortsude parandamisel ja naha niisutamisel. Aptamiin C kompleks võib samuti aidata leevendada nahka karmides tingimustes.

improve skin whitening22